摘要

近日，浙江大学连佳长课题组在BiotechnologyandBioengineering杂志上在线发表研究论文“Constructionofajmalicineandsanguinarinedenovobiosyntheticpathwaysusingstableintegrationsitesinyeast”（doi:10./bit.），报道了利用酿酒酵母中稳定整合位点构建阿玛碱和血根碱的从头生物合成途径。阿玛碱是从长春花和萝芙木提取的单萜吲哚类生物碱,是有效的外周血管扩张剂；血根碱是从博落回提取的苄基异喹啉类生物碱，具有抗菌、杀虫、护肝和抗肿瘤等功效；作为植物源天然抗菌剂，目前主要作为抗生素替代品使用。

内容

多基因通路的组装通常被认为是构建天然产物细胞工厂的第一个关键步骤。自从在酵母中建立CRISPR/Cas系统以来，已被广泛用作精确基因组编辑的必备技术。目前，已经开发了各种基于CRISPR的多重基因组整合系统，用于多基因或多拷贝整合。例如，CrEdit系统能够同时整合参与β-胡萝卜素生物合成的3个途径基因（84%的整合效率与约bp的同源臂）（Rondaetal.，）。同样，开发了Di-CRISPR以在一个步骤中实现从8kb到24kb的DNA构建体的多拷贝和无标记整合，且效率很高（Shietal.，）。但这些研究更多